助力CAR-T及免疫细胞治疗研究
产品介绍:
SAFIRE(Sodium Azide Free Immensely Reduced Endotoxins)类产品是BioGems品牌下的功能性抗体,经特殊工艺生产、纯化,具有诸多优点,可用于免疫细胞功能的激活、阻断、中和研究,是肿瘤免疫研究的重要工具。
极低的内毒素含量,低于0.01EU/μg蛋白
无叠氮钠,适用于体内或体外实验
高蛋白纯度
CAT-T活化:CD3/CD28激发型抗体
CAT-T鉴定:预包被的ELISA试剂盒
小鼠脾脏T细胞的扩增方案
小鼠CD3/CD28功能性抗体:
1、用PBS稀释配置anti-CD3功能性抗体并铺板,浓度为1-5μg/ml。根据需要选择并计算所需抗体的量。以96孔板为例,每孔加入50 μl(6孔板500μl)。37℃ 2h或者4℃过夜(过夜包被效果比较好)。
2、加入细胞前吸去孔内抗体溶液,加入200μl(6孔板2ml)PBS洗涤2次,去除未结合抗体。
3、研磨小鼠脾脏,PBS洗涤细胞1次,离心后的沉淀弹散,加入2ml红细胞裂解液(1X)(Cat#64010-00-100),室温裂解5min,用完全培养基洗涤细胞一次。(注:推荐使用BioGems红细胞裂解液,裂解温和,对骨髓细胞损伤小!)
4、用含有anti-CD28(1-2ug/ml)以及IL-2(10-50ng/ml)的完全培养基重悬细胞,加入96孔板(或6孔板内)。(96孔板加入3×105 细胞,6孔板加入5-8×106 细胞)。
5、培养过程中隔天换液,进行细胞计数并观察细胞状态,培养3-5天即可见到细胞明显增殖。
4、用含有anti-CD28(1-2ug/ml)以及IL-2(10-50ng/ml)的完全培养基重悬细胞,加入96孔板(或6孔板内)。(96孔板加入3×105 细胞,6孔板加入5-8×106 细胞)。
5、培养过程中隔天换液,进行细胞计数并观察细胞状态,培养3-5天即可见到细胞明显增殖。
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